· polüakrüülamiidgeel peab kokku akrüülamiidi monomeeri, polümerisatsiooni lähtematerjali, katalüsaatorit ning soola ja puhversegu õigust.
· akrüülamiidja bis (n, n '- metüleen kahekordne akrüülamiid) on monomeeri vorm geel maatriks.
· Ammoonium püsfaat käivitage liimpolümerisatsiooniprotsess. Liimi formuleerimine nõuab vees valmistatud 10% ammooniumpsulfaadi lahust. Suurem osa teabest näitas aktiivse kasutamise vajadust. 10% -lise lahuse saab aga asetada 4 ℃ -ni, ilma et oleks olulist aktiivsust kaotamata. Mooge kuni 10 ml ja visake ära, kui liim ei agremendi.
Näpunäide: protsentakrüülamiidLiimi ja valguliimi sekveneerimisel pole sama. Eelvaliku akrüülamiidi kasutamisel: BIS -lahendus, hankige kindlasti õige pudel.
· TeMed (n, n, n ', n'- tetrametüüla etüleendiamiin) on katalüsaator, pruunis pudelis, asetatud külmkappi. Lisage vahetult enne liimi valamist.
· Elektroforeesis kasutatud klaasi kasutatud polüakrüülamiidi elektroforeesis tuleks enne ja pärast iga kord pesta. Pärast elektroforeesi peske pehme pintsli ja riidega kuumas seebivees, loputage destilleeritud veega ja seiske kuivama.
· Niiskus ja tolm võivad õõnes polümeeriga põhjustada. Enne elektroforeesi puhastage klaasplaat klaasist puhastusvahendiga ja pühkige see pehme pintsliga. Pese destilleeritud veega ja kuivatage hoolikalt paberitüpiga. 70% etanooliga loputamine enne paberiga pühkimist aitab kuivatada ja kiirendada. Lisage järjest akrüülamiidi proovid: bis, vesi, puhverlahus, ammoonium persulfaat, teMed. Raputage hästi ja valage kohe.
Enne polümerisatsiooni ei ole vaja polüakrüülamiidi degassi. (Akrüülamiid paigutati mullide eemaldamiseks vaakumisse, kuna hapnik pärsib polümerisatsiooni.)
Horisontaalse liimipunkti proovi näpunäited.
· Pange alumisse kasti musta paberitükk, must taust, et teha mõni prooviauk, et selgemalt näha.
· Liimipaagi täidetud puhver, veidi üle kolloidi.
· Kui servas on valgus, lülitage tuled sisse, laske valgusel kolloidi särada. Joonistage proov pipetisse.
· Automaatse pipeteerimisseadme kasutamine.
· 10-200 MU 1-s saab vedelat liikumispunkti kasutada enamikus proovipunktides. Väga väikeste proovide aukude (vähem kui 10μ1) korral on pikka pipetipea, mida kasutatakse liimi sekveneerimiseks, mugavam.
· Pipeteerimine sukeldas lihtsalt proovi, sissehingades aeglaselt liikuvat vedelikku. Proov võib tunduda glütseriiniga kleepuv ja kiire pumpamine võib pipetipea sisse õhumullid tõmmata.
· Proovid pärast pipeteerimispea sissehingamist liiguvad vedeliku pea õrnalt toru servale või pühkimispaberi imeb vedela pea väljapoole tilkade. Olge ettevaatlik, et proovi ei imeks.
Pange proov proovi auku
· Pipeteerimisseade väikese rõhu hoidmiseks, muutke proovid pisut ülevoolu vedela pead.
· Puhvrisse sisestatud pipeteerimispea, pisut kõrgem kui laiguaugud, säilitavad positiivse rõhku. Pipeti otsa saab sisestada väikesesse auku.
· Proovid aeglaselt ja ühtlaselt välja. Pipeti ots asetatakse punktproovi augu kohale ja proov vajub auku. Laske proovis vajuda proovi auk, selle asemel, et sisse suruda.
· Kui viimane tilk vedela peaga prooviga liigub vedelik teisele jalale, tõstab vedeliku aeglaselt, liigub puhvrist välja
Kuidas teha vertikaalset liimi proovide võtmist?
· Kahe klaasise tüki vahel moodustatud vertikaalsed liimipunkti prooviaugud. Väga õhukese liimi korral ei saa pipetipea isegi kahe klaasplaadi vahele sisestada. Vaadake glütseriini! Pange pipetipea prooviava kohale ja proov vajub auku.
· Punktiproov enne, pange kindlasti polüpropüleenist atsüülgeeli proovi auk vertikaalne punkt. Pese ära mittelümeerimata akrüülamiid ja vesi, mis võib ilmneda proovi augu allosas. Vesi võib proovi augu oluliselt väiksemaks muuta. Kasutage 25 ml või 50 ml süstal ja 18-mõõtmelist nõela. Valage elektroforeesi puhver ja loputage proovi auk ettevaatlikult.
· Proovi auku võib olla keeruline, kuid samal ajal on ülejäänud lihtne. Kui on ülemääraseid auke, saab proovipuhvrit testida bromofenoolsinisega.
Postiaeg: 31-2023